技术简介
全基因组甲基化测序(WholeGenome Bisulfite Sequencing,WGBS),广泛应用于细胞分化、组织发育等基础机制研究,以及动植物育种、人类健康与疾病治疗等研究领域。
甲基化是基因表达的主要调控方式之一,研究染色体DNA的甲基化情况是了解基因调控的基础获得全基因组范围内所有C位点的甲基化水平数据,对于表观遗传学的时空特异性研究具有重要意义。用标准bisulfite方法处理DNA后,未甲基化的胞嘧啶C会脱氨基形成尿嘧啶U。经过PCR扩增,尿嘧啶U替换为胸腺嘧啶T,而发生甲基化的胞嘧啶C保持不变。我们以新一代高通量测序平台为基础,进行低成本、高效率、高准确度的全基因组DNA甲基化水平图谱绘制。特定物种的高精确度甲基化修饰模式的分析,必将在表观基因组学研究中具有里程碑式的意义,并为细胞分化、组织发育等基础机制研究,以及动植物育种、人类健康与疾病研究奠定基础。
1. 基因组DNA提取
2. Bisulfite转化
3. 文库富集
4. 高通量测序
5. 生物信息学分析
1. 原始数据
2. 数据预处理、质控
3. 转化效率评估
4. Mapping至参考基因组
5. 甲基化水平计算
6. 差异甲基化位点和区段筛选
7. 差异基因及CpG岛注释
送样要求
DNA样品总量:≥3ug(物种基因组≤1.5GB);
≥6ug(物种基因组≤3GB);
≥7ug(物种基因组≤3.5GB);
项目周期
60个工作日(数据量≤600G)
70个工作日以上(数据量≥600G)
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