全新RNP递送工具 Nanoparticles（CRISPR Cas9/sgRNA NPs）for 293T细胞等

有效地将Cas9/sgRNA RNP传递到广泛的细胞类型, 例如 293T细胞等。

Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles（Cas9/sgRNA NPs）是什么？

Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles（Cas9/sgRNA NPs）是由Cas9蛋白、客户设计的sgRNA和颗粒骨架蛋白共同表达产生的，这些蛋白通过自组装介导Lumiere NPs从生产细胞的细胞膜上释放出来。Lumiere NPs被分泌出来，它们就可以被收获、浓缩，并用于感染靶细胞。NPs被靶细胞识别并融合后，活性Cas9/sgRNA RNP复合物被进一步运输到细胞核进行高效的基因编辑。

Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles（Cas9/sgRNA NPs）是如何工作的？

1. 将纯化的靶点质粒（稀释至750μl）添加至Cas9/sgRNA NPs Packaging Mix 1中，涡旋混匀；

2. 将混合的Mix1加入到Cas9/sgRNA NPs Packaging Mix 2中；

3. 将上述混合物放在培养皿中与研究的细胞(例如,293T细胞)一起培养；

4. 48-72小时后，离心5min，收集细胞培养上清。

图1. Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles（Cas9/sgRNA NPs）工作流程图

Lumiere   Cas9/sgRNA NPs有哪些优势？

产品优势

. 细胞转染效率极高，可达50-100%, 包括难转染的细胞

· NPs不会受限于AAV的包装大小

. 不会出现LV的随机整合问题

· 低细胞毒性，不会影响后续细胞的活力和生长

· 递送范围广，能满足绝大部分细胞类型的递送，例如：293T细胞，Hepa1-6 Cell, Primary hLESC, RD Cell, K562 Cell等。

· 能够实现RNP高效的递送效率

· 以递送RNP复合物为主，大大降低了脱靶风险和整合风险

· 优化过的配比能实现高效的包封率，可在实验室实现包装生产

想提高细胞转染效率？想减少细胞毒性？

NPs非常适合比较难转染的细胞，细胞转染效率高达50-100%，例如一些肿瘤细胞、原代细胞、干细胞，也适用于细胞比较珍贵、对毒性要求特别低的场景。

另外，CRISPR-cas9编辑基因多多少少会有一些脱靶的情况，如果对编辑过的细胞的遗传背景干净度要求高，例如，想要一个293T细胞中敲除某个基因用来做测序，进行大数据分析，这时研究人员就可能希望其他基因不会受到CRISPR-cas9的影响，或者想将这种影响降到最低，这种场景NPs也非常适合。

Lumiere   Cas9/sgRNA NPs适合哪些领域？

适用领域

·原代细胞编辑

·背景更加干净的基因编辑细胞系

·干细胞编辑

·其他动物来源的细胞

Lumiere   Cas9/sgRNA NPs的敲除效率如何？

图2 不同细胞类型中的敲除效率

产品规格