CRISPR/Cas蛋白检测

DNA探针/荧光探针

【产品名称】Magigen单链 DNA 荧光报告探针(FAM 通道)

【产品编号】C009S

【预期用途】本产品用于 CRISPR 技术平台的检测类产品开发

【包装规格】100 pmol/管（50 tests）

【产品内容】单链 DNA 荧光报告探针(2 μM)，50 μL

【DNA探针技术检验原理】

CRISPR/Cas 检测体系中，Cas 蛋白在向导 RNA 引导下识别并切割靶标双链 DNA 时，其“附属切割”活性被激活，可高效切割体系中非特异单链 DNA(ssDNA)。通过设计两端标记 荧 光 基 团 或 者 其 他 标 记 物 的 ssDNA 探 针 ， 可 实 现CRISPR/Cas 对 DNA 模板的检测和信号放大。常用的检测方法包括实时荧光法和胶体金层析法。目前该系统已经广泛应用于微生物、植物和动物的基因编辑研究中，并在分子诊断方面有非常大的应用前景。

【储存条件及有效期】本产品于-20℃密封避光保存，有效期 12 个月。

【适用仪器】酶标仪，如 BioTek Synergy，或具有 FAM 荧光通道的定量PCR 仪。

如何使用DNA探针？

【检验步骤】

荧光探针法

1. 反应底物制备

    反应底物可为 LAMP/ PCR/RPA 等方法的核酸扩增产物。

2. CRISPR/Cas 反应体系

使用仪器为酶标仪时，提前设置程序并预热。Filter Set: Green（Ex: 485/20, Em: 528/20）， 反应温度 37℃，每 1 ~ 4 min 读取一次荧光数值，时间 30 min ~ 1h。

3. 结果分析

CRISPR/Cas反应结果阴阳性判断如下图所示。

【注意事项】

1. 本产品仅供科研使用，使用前请仔细阅读本说明书。

2. 请严格按照基因扩增实验室的管理规范进行实验操作，注意防止扩增产物污染。

3. 实验结束后，检测过程中所产生的废弃物应按照相关规范进行处理。

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