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【产品编号】 A018L
【产品名称】热敏型 UDG 酶
【包装规格】100U/1000U/5000U
【产品内容】
| 组份 | A018L |
| UDG¹ | 1000 µl （5 U/µl） |
| 10×Reaction Buffer 7² | 1ml×20 |
1 本产品最佳反应温度为 37℃，但在 20-50℃的广泛区间内都有 较佳的活性，95℃ 2min 可以使其完全失活；在超过 100mM K+ 或 Na+的体系中残留活性约为原始活性的 70%，需要增加使用量。
2 200mM Tris-HCl（pH8@25℃），10mM DTT，10mM EDTA。
【产品概述】
美格生物是UDG酶专业生产厂家，热敏型 UDG 酶（尿嘧啶-DNA 糖基化酶）为本实验室自行 培养的细菌中筛选并提取纯化，和来自大肠杆菌的 UNG 类似， 它可水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶-糖苷键、切除尿嘧啶并在 DNA 中产生碱敏感的无碱基位点。这些无碱基位点可通过核酸 内切酶、加热或碱处理进行水解，和来自大肠杆菌的 UNG 不同 之处在于该酶表现出较低的热稳定性，因此更容易使其失活。根 据 DNA 制备方式，UDG 酶可用于实现常见的位点特异性或链特 异性 U-DNA 切割。
【活性定义】
一个单位的定义是在 37℃ 60 分钟内完全降解 1 μg 纯化的 单链含尿嘧啶 DNA（M13）所需的尿嘧啶-DNA 糖基化酶量。
【储存条件及有效期】
本产品于-20℃密封保存，有效期 12 个月。
【特异性】
1. 可在单链和双链 DNA上的 U-DNA 位点水解尿嘧啶糖苷键、 切除尿嘧啶并在 DNA 中产生碱敏感的无碱基位点。
2. 对于单链 DNA 和双链 DNA 均具有活性。
3. 对于 RNA 及天然不含尿嘧啶的 DNA 不具有活性。
4. 对金属离子没有要求，在 EDTA 存在情况下依然具有完全 的活性。但是在超过 100mM K+或 Na+的体系中残留活性 约为原始活性的 70%，需要增加使用量。
热失活：95°C，2 min
【应用】
UDG 酶可用于在已掺入脱氧尿苷酸残基的任何位点切割 DNA。由于 UDG 酶的热不稳定性，该酶的主要应用是预防 PCR3 中的残留污染。
3 本产品在 PCR 中使用量建议为 0.2U-1U/25μl，在一步法 RT-qPCR和55-65℃进行的恒温扩增中建议使用量不超过0.2U/25 μl，在低于 50℃的恒温扩增中（如 RPA、RDA、RAA 等）无法 使用本产品。
【推荐反应体系】
| 组分 | 体积/质量 |
| 10×Reaction Buffer 8 （或其他 PCR buffer）⁴ | 2.5 μL |
| Taq DNA Polymerase | 0.25~1μL |
| Foward Primer(10 μM) | 0.5 μL |
| Reverse Primer(10 μM) | 0.5 μL |
| 模板 | 1 pg-100 ng |
| 2mM dNTPs⁵ | 1 μL |
| UDG | 0.2~0.5U |
| ddH2O | Up to 25 μL |
4 若体系中单价盐含量超过100mM，建议UDG使用量为0.5~1U。
5 根据不同 DNA 聚合酶对 dUTP 掺入的性能建议 dNTPs 配比为 A:T:C:G:U=2:1:2:2:2 或用 dUTP 完全替代 dTTP。
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