CRISPR-Cas免疫系统将外源DNA片段做为间隔， 将其整合到主CRISPR位点，用来提供感染分子记忆。

Cas4蛋白广泛分布于CRISPR-Cas系统，被认为参与了间隔物的获取，尽管它们的确切功能尚不清楚。

我们的研究发现，在Cas1-Cas2催化整合之前，为了形成有效的预间隔过程，需要嗜碱芽孢杆菌Bacillus halodurans 类I-C Cas4。

Cas4与cas1整合酶紧密的相互作用，形成一个异六聚体复合物heterohexameric complex，其中包含2个Cas4二聚体和2个Cas4亚基。

由于Cas1和Cas2的存在, Cas4用长3'悬，通过特定位点的内源性核苷酸裂解(endonucleolytic cleavag）， 来处理双链基板。

Cas4识别预间隔内的PAM序列，防止未经处理的预间隔集成，确保只有功能区将被整合到CRISPR阵列。

我们的研究结果显示，在CRISPR适应期间，为了维持预间隔不变，为预间隔处理和整合提供架构和机理模型，Cas4扮演着十分重要的角色。

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参考文献

Cas4-Dependent Prespacer Processing Ensures High-Fidelity Programming of CRISPR Arrays

Hayun Lee, Yi Zhou, David W. Taylor, Dipali G. Sashita

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