【 产品编号】 C002S/M/L
【 产品名称】Magigen CRISPR-Cas9蛋白 | SpCas9 Nuclease 蛋白
【 Cas9蛋白用途】本产品用于基于 CRISPR基因编辑技术平台相关研究
【 包装规格】70pmol/400pmol/2000pmol
【 产品内容 】
货号 | C002S | C002M | C002L |
10×Cas9 Reaction Buffer | 1ml×1 支 | 1ml×2 支 | 1ml×6 支 |
SpCas9 Nuclease,NLS 蛋白 | 70µl(1µM) | 40µl(10µM) | 100µl(20µM) |
1×Cas9 Dilution Buffer | / | 1ml×1 支 | 1ml×2 支 |
【 Cas9蛋白产品介绍 】
美格生物是CRISPR-Cas9蛋白专业生产厂家,Cas9蛋白是RNA导向的序列特异性双链DNA内切酶。向导RNA通过与靶序列互补来识别靶位点,并将CRISPR-Cas9 Nuclease 带到靶DNA 上。 CRISPRCas9蛋白有两个切割活性中心,分别切割靶DNA的两条链从而产生DNA双链断裂。切割位点位于目标序列(target sequence)内,离 PAM(NGG)区3个碱基。PAM 对于 Cas9 Nuclease的识别和切割都是必需的。整个体系必需使用不含任何核酸酶的试剂及耗材;
本产品为重组蛋白,其 N- 端和 C- 端均携带 NLS 片段 ;
本产品 1pmol=163ng。 。
【储存条件及有效期】
本产品于-20℃密封保存,有效期 12 个月。
【 使用方法 】
推荐Cas9反应体系:
使用无菌及 DNase/RNase free 耗材配置反应体系
组分 | 反应体系 |
Nuclease-free water | 16 µL |
10×CRISPR/Cas9 Reaction Buffer | 3 µL *1 |
300nM sgRNA | 3 µL (30 nM final) |
1µM CRISPR/Cas9 Nuclease, NLS | 1 µL (~30 nM final) |
Reaction volume | 27 µL |
25℃孵育 10min 或 37℃孵育 5min | |
30 nM substrate DNA | 3 µL (3 nM final) |
Total reaction volume | 30 µL *2 |
37℃孵育 20min 后进行琼脂糖电泳检测 *3 |
备注:
1. Magigen 体系可以与 NEB buffer3.1 兼容,不建议使用 NEB buffer 3 或其余品牌 Cas9 Reaction buffer;
2. 反应体系可以依据实验人员设计自行等比例放大或缩减,建议最小反应体系为 15µl;
3. 反应前将体系混匀并短暂离心;反应完成后,可以立即进行电泳检测,因反应组分中含有抑制 RNase 物质,有小概率情况下可能导致电泳出现拖带现象,可以使用终浓度约 0.2ug/ml protein K 消化后电泳,或减少电泳时上样样品的用量;
注意:sgRNA 的设计及稳定对反应体系有很大的影响,反应进行前,可通过凝胶电泳检测sgRNA 是否出现降解;同时推荐体系中 Cas9:sgRNA:模板 DNA=10:10:1(摩尔比),优选使用过量的 sgRNA。
【Magigen Magicscript crispr cas9蛋白购买指南】
1. crispr cas9蛋白价格
crispr cas9蛋白的价格会随外汇汇率的波动而变化,请以实际价格为准。
2. crispr cas9蛋白运输
crispr cas9蛋白价格是产品含税价格。没有包含运费等其他费用。有些产品需要采用干冰运 输方式,请在购买前咨询运费、是否支持干冰运输等事宜。
3. crispr cas9蛋白图片仅供参考,请以实际为准。
咨询热线:18027152056
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